徠卡共聚焦顯微鏡中細胞生物學功能

1．粘附細胞的分選：Meridian公司生產的ultMa型徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡成侶儀是目前世界上*能對粘附細胞進行分選的儀器，而這種不改變細胞周圍培養(yǎng)環(huán)境、細胞鋪展程度相生長狀態(tài)的分選方式是至關重要的。它有兩種方式：一種是燦1ahon方式，另一種是CookieCM小。8方式。

AN川on方式原理是；在特制的培養(yǎng)皿上有兩類細胞，一類是未作熒光染色的細胞群，另一類是作熒光染色的細胞群，利用高能激光把染色的細胞群殺死，而把末染色的細胞群保留并且繼續(xù)培養(yǎng)．這種方式適用于數量較多細胞的分選。

Co‘，k；eCMuinR方式原理是：利用高能量激光：F底部帶膜的特制培養(yǎng)皿上在欲選細胞周圍切割成八角形，而非選細胞則因在該幾何形狀之外而被除去，它適用于選擇數量較少的突變細胞、轉移細胞和雜交瘤細胞。

基于這兩種方法，徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡能夠做到：⑦總體掃描細胞群；⑦根據細胞

物理和少化特性進行分選；②對以百力分之‘機率發(fā)生的突變細胞進行篩選；①不改變

細胞形態(tài)、類型和活性而克隆細胞；、員分離細胞亞群以進行定量熒光分析；⑥自動儲分細胞位迎，以對待定細胞進行重復測定。

2．激光細胞顯微外科及光陷阱技術：激光掃描共聚焦顯微鏡可將激光作“光子刀”使用，以完成細腦膜瞬間穿孔，線粒體、溶酶體等細胞器燒灼，染色體切割、神經元突起切除等一系列細胞外科于術。

光陷阱（opticnltr，p）技術是利用激光的力學效應，將一個微米級大小的細胞器或其以村6鉗制于激光束的焦平面，也可稱為光鉗。可利用光鉗技術來移動拙胞的微小別粘和結構（如染色體、細胞器）、進行細胞融合、機械刺激及細胞骨架彈性測址等。

3.熒光光漂白恢復（FR八P）技術：此技術借助于高強度脈沖式激光照射細胞的某一區(qū)域，從而造成該區(qū)域熒光分子的光淬火，該區(qū)域周圍州F淬滅熒光分子將以一定速率向受照區(qū)域擴散，用激光掃描共聚焦顯微鏡可邑接對此擴散速率進行監(jiān)測．由此揭示細胞結構和各種變化的機制，因而可用以研究細胞骨架構成、核膜結構和大分子組裝等。

4．胞間通訊的研究：動物細胞中縫隙連接介導的胞間通訊被認為在細胞增殖和分化中起著非常重要的作用。徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡通過測量細胞縫隙連接介導的分子轉移，觀察相鄰細胞之間的胞間通訊?？捎糜谘邢饶[瘤啟動因子、生長因子以及細胞內物”、pH相cAMP對縫隙連接祁胞間通訊的影響。

5．細胞膜流動性測定：細胞膜熒光探針受到極化光線激發(fā)后，其發(fā)射光極性依賴于熒光分子的旋轉，而這種有序的運動自由度依賴于熒光分子周圍的膜流動性，故極性測員叮間接反映細胞膜的流動件。因此，通過計算機軟件，徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡可對細胞膜的流動性進行定量和定性分析。這種膜流動件測定在膜的磷脂酸織成分析、藥物效應和作用位點、溫度反應測定及物種比較等方面有重要作用。

備注：徠卡共聚焦顯微鏡中細胞生物學功能部分文章由北京中儀光科科技有限公司編輯整理上傳。